Institutional creator:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego PAN

Contributor:

Konopka, Witold (1975- ) : Promotor ; Magalska, Adriana (1976- ) : Promotor pomocniczy

Publisher:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. M. Nenckiego PAN

Place of publishing:

Warszawa

Description:

[4], 156 stron : ilustracje ; 30 cm ; Bibliografia ; Streszczenie w języku angielskim

Degree grantor:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego PAN

Type of object:

Praca dyplomowa

Abstract:

W jądrze komórkowym oprócz materiału genetycznego i maszynerii niezbędnej doekspresji genów obecne są dodatkowe struktury, które pełnią różnorodne funkcje. Jedną z nichsą ciałka jądrowe PML (ang. promyelocytic leukemia nuclear bodies), które są strukturamidynamicznymi i funkcjonalnie niejednorodnymi. Głównym i niezbędnym elementem ciałekjądrowych PML jest białko PML. Ciałka jądrowe PML są często zlokalizowane w miejscachaktywnych transkrypcyjnie oraz służą jako rezerwuar wielu innych białek jądrowych. Zewzględu na zróżnicowane funkcje tych białek, ciałka jądrowe i białko PML są pośredniozaangażowane w szereg procesów, które mogą mieć istotny wpływ na prawidłowefunkcjonowanie mózgu zwierząt. Dotąd nie zbadano roli białka PML dla prawidłowegofunkcjonowania dojrzałego mózgu myszy. Poziom ekspresji białka PML w poszczególnychstrukturach mysiego mózgu jest zróżnicowany i zależy także od wieku zwierzęcia.U dorosłych myszy relatywnie wysoki poziom białka PML występuje w hipokampie,strukturze związanej z uczeniem się i pamięcią.Głównym celem pracy było zbadanie wpływu białka PML i ciałek jądrowych PML namorfologię jądra komórkowego neuronów hipokampa i na funkcje kognitywne dorosłychmyszy. Aby osiągnąć założony cel, otrzymano i przebadano dwa modele zwierzątzmodyfikowanych genetycznie. Jeden z modeli, z podwyższonym poziomem białka PMLw hipokampie, uzyskano poprzez wprowadzenie dodatkowej sekwencji PML za pomocąwektora wirusowego AAV jako nośnika genu. Drugi z modeli, z delecją białka PMLw hipokampie, otrzymano z wykorzystaniem wektora wirusowego AAV dostarczającegosekwencję gRNA dla PML w Cre-zależnym systemie CRISPR/Cas9.Przeprowadzono testy behawioralne (w systemie klatek IntelliCage) sprawdzająceformowanie pamięci przestrzennej i proceduralnej, pamięci operacyjnej oraz poziom progulękowego. Wykazano, że delecja białka PML w neuronach hipokampa pogarsza pamięćoperacyjną i obniża próg lękowy zwierząt. Pokazano także, że podwyższenie lub obniżeniepoziomu PML nie ma wpływu na formowanie pamięci przestrzennej i proceduralnej. Analizamikroskopowych obrazów jąder komórkowych neuronów hipokampa wykazała znacznezmiany ich morfologii oraz zmiany organizacji chromatyny w przypadku podwyższonegopoziomu, lecz nie delecji, białka PML. Potranslacyjne zmiany histonów wykazały, żew modelu z podwyższonym poziomem białka PML chromatyna aktywna transkrypcyjnie jestbardziej upakowana. Natomiast chromatyna, która jest nieaktywna transkrypcyjnie, wykazujezwiększony udział modyfikacji związanych z konstytutywnym wyłączeniem genów kosztemudziału modyfikacji związanych z fakultatywnym wyłączeniem genów. Modulacja poziomuPML prowadzi do współmiernego obniżenia lub zwiększenia obecności w jądrzekomórkowym białka DAXX, partnera PML zaangażowanego w aktywację genów wczesnejodpowiedzi na stymulację aktywności neuronalnej

Detailed Resource Type:

Praca doktorska

Resource Identifier:

oai:rcin.org.pl:236268

Source:

IBD PAN, sygn. 20058 ; click here to follow the link

Language:

pol

Language of abstract:

eng

Digitizing institution:

Instytut Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego Polskiej Akademii Nauk

Original in:

Biblioteka Instytutu Biologii Doświadczalnej im. Marcelego Nenckiego PAN

Access:

Otwarty